大腸菌群細菌多存在于溫血動物糞便、人類經(jīng)常活動的場所以及有糞便污染的地方，人、畜糞便對外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。大腸菌群是評價食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標之一。而檢測食品中大腸菌群的方法中，國內(nèi)采用的進出口食品大腸菌群檢測方法主要有國家標準，國家標準的三步九管法，即乳糖發(fā)酵試驗、分離培養(yǎng)、證實試驗。

    由于大腸菌群指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌，即：需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。因此大腸菌群的檢測一般都是按照它的定義進行。

1.乳糖發(fā)酵試驗：樣品稀釋后，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h，觀察是否產(chǎn)氣。

2.分離培養(yǎng)：將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅美藍瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形態(tài)。

3.證實試驗：挑取平板上的可疑菌落，進行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h，觀察產(chǎn)氣情況。

    在乳糖發(fā)酵試驗工作中，經(jīng)?？梢钥吹皆诎l(fā)酵倒管內(nèi)極微少的氣泡（有時比小米粒還?。?，有時可以遇到在初發(fā)酵時產(chǎn)酸或沿管壁有緩緩上浮的小氣泡。實驗表明大腸菌群的產(chǎn)氣量，多者可以使發(fā)酵倒管全部充滿氣體，少者可以產(chǎn)生比小米粒還小的氣泡。

    在試驗過程中，會用到高壓滅菌器來進行滅菌，九管法滅菌時，大腸菌在高溫下會產(chǎn)生氣泡，如果用的是ALP高壓力滅菌鍋，可以通過進入工程師菜單，調(diào)整在升溫過程中的排氣時間，可以有效的排走殘留在培養(yǎng)基中的氣泡。 

初始界面

滅菌中

滅菌結束

 培養(yǎng)基中有氣泡

    目前市面上，高壓滅菌器品種繁多，有進口的有國產(chǎn)的高壓滅菌器，高壓滅菌器產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊。在業(yè)內(nèi)質(zhì)量口碑的當屬東南科儀總代理的日本ALP高壓滅菌器，日本ALP高壓滅菌器具備《進口壓力容器生產(chǎn)許可證》、《進出口鍋爐壓力容器安全性能檢驗證書》以及高壓滅菌器上的壓力表和減壓閥，送當?shù)赜嬃坎块T計量后取得計量證書。

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